Skip to content

Izolacja antybiotykoopornej bakterii Salmonella z detalicznych produktów mięsnych ad

2 tygodnie ago

524 words

Wyodrębniliśmy i scharakteryzowaliśmy szczepy salmonelli z mięsa mielonego uzyskanego na rynkach detalicznych w większym Waszyngtonie, obszarze i ustaliliśmy fenotypy oporności na antybiotyki izolatów. Metody
Zbieranie detalicznych próbek mięsa i izolacja Salmonelli
Dwieście próbek mięsa mielonego (51 próbek kurczaka, 50 wołowiny, 50 indyków i 49 wieprzowiny) zakupiono w trzech sklepach detalicznych reprezentujących trzy sieci supermarketów w Waszyngtonie, w okresie od czerwca do września 1998 r .: 98 w sklepie 1, 54 w sklepie 2 i 48 w sklepie 3. Wszystkie próbki drobiu i wieprzowiny były przetwarzane i pakowane w jednym z czterech zakładów przetwórstwa drobiu i jednego zakładu przetwórstwa mięsa wieprzowego, podczas gdy wszystkie próbki wołowiny były mielone w zapisz i zapakuj. Salmonella wyizolowano z mięsa mielonego za pomocą metod opisanych w Bacteriological Analytical Manuał Food and Drug Administration.11
Serotypowanie, typowanie faga i elektroforeza w żelu polowym pulsacyjnym
Serotypy Salmonella zostały określone przy użyciu dostępnej komercyjnie antysurowicy (Difco, Detroit), zgodnie z instrukcjami producenta. Osiem izolatów S. enterica typhimurium, które były oporne na co najmniej pięć antybiotyków, wybrano do analizy fagowej przeprowadzonej w Państwowych Laboratoriach Usług Weterynaryjnych Wydziału Rolnictwa w Ames, Iowa.
Elektroforezę w żelu elektroforetycznym stosowano do rozdzielania fragmentów DNA powstałych w wyniku trawienia przez enzymy restrykcyjne. Uzyskane profile genomowego DNA lub odciski palców zostały zinterpretowane zgodnie z ustalonymi wytycznymi.12-14 Aby uznać część klastra, wzory DNA nie mogły się różnić od siebie o więcej niż 30 procent. Wzory, które były tej samej wielkości i miały taką samą liczbę prążków, uznawano za ten sam szczep (np. Typ A). Wzory, które różniły się mniej niż czterema pasmami, uważano za reprezentujące podtypy w obrębie głównej grupy (np. A1, A2 i A3). Wzory, które różniły się od głównego wzoru o cztery lub więcej pasm, uważano za reprezentujące różne szczepy (np. Typ A, B lub C).
Testowanie pod kątem wrażliwości na środki przeciwdrobnoustrojowe
Izolaty Salmonella badano pod kątem wrażliwości na 17 antybiotyków stosowanych w Krajowym Systemie Monitorowania Oporności na Antybiotyki.15 Minimalne stężenia hamujące zostały określone metodą bulionowo-mikrorozcieńczeniową przy użyciu systemu Sensititre (Trek Diagnostic Systems, Westlake, Ohio) i zalecanej kontroli jakości organizmy. Wyniki zostały zinterpretowane zgodnie ze standardami Krajowego Komitetu Klinicznych Standardów Laboratoryjnych, jeśli są dostępne.16,17
Wzmocnienie
Ponieważ oporność na sulfonamidy przeciwdrobnoustrojowe jest charakterystyczna dla integronów klasy 1, izolaty salmonelli oporne na sulfamoksazol zostały przebadane pod kątem obecności takich integronów. Ponadto izolaty wykazujące oporność na cefalosporyny o rozszerzonym spektrum działania ceftiofur i ceftriakson badano pod kątem obecności genu .-laktamaz o rozszerzonym spektrum działania bla CMY-2. Aparaty klasy amplifikowano za pomocą reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR) i starterów 5 -CS (5 GGCATCCAAGCACAAGC3 ) i 3 -CS (5 AAGCAGACTTGACTGAT3 ) .18 Gen blaCMY-2 amplifikowano za pomocą zastosowanie starterów cmy-F (5 GACAGCCTCTTTCTCCACA3 ) i cmy-R (5 TGGAACGAAGGCTACGTA3 ) 19 Amplifikacje przeprowadzono jak opisano powyżej.18,19
Analiza sekwencji nukleotydów
Produkty PCR integronów i geny bla Cmy zostały oczyszczone zestawem (Boehringer Mannheim, Indianapolis)
[więcej w: nortryptylina, psychoza starcza, choroba autosomalna ]
[podobne: rozedma podskórna, zgrubienie opłucnej, padaczka pourazowa objawy ]